如何选择一个合适的载网来准备您的冷冻电镜样品

过去的冷冻电镜载网上通常是一层具有蕾丝样孔的薄膜，穿孔排列不规则。

然而，随着技术的发展，现如今可以使用几何图案化的多孔薄膜，可以简化数据收集工作^（1）。

制样完成后，载网将被夹持在一个更加坚固的C-ring中形成Autogrid，再送入电镜中收集数据。

目前VitroJet创新的使用预卡环载网来优化冷冻电镜的制样过程，即先卡环，用Autogrid制样，这样可以增加制样的灵活性与安全性，避免载网在制样及转移过程中的损坏。

除了载网的材料，载网的规格也至关重要，一般来说，选择300目或400目的载网，它们具有更高的稳定性和足够的成像区域。也有些用户会选择200目，相较于300和400目的载网，它的Bar相对稀疏，这样成像区域会更大，但对载网上薄膜的支撑性会差一些。

根据样品类型和成像方案选择合适的载网，VitroJet配备高速高清摄像机，可以清晰的拍摄支持膜和涂抹在上面的样品，这样可以在制样时明确样品制备的冰层厚度和涂抹有样品的区域，因此可以提高用户的制样效率。

例如纳米线自吸附载网^（3）、

基于MEMS（微电子机械系统）的纳米流控芯片等方式^（4），

载体本身就可以控制样品层的厚度。

添加可以黏附颗粒的超薄连续薄膜，会影响颗粒的进孔数量、

分布、取向优势和气液界面等^（5）。

而且功能化的连续薄膜会有些对颗粒的特异性吸附^（6），

比如his-tag、生物物理研究所新研发的HFMI膜等。

较小的载网支持膜孔直径可以降低成像时电子束的冰层变形，可以提高成像质量。